赤眼蜂(Trichogramma ssp. ) 被廣泛用于防治稻縱卷葉螟、玉米螟、松毛蟲等農林害蟲,在常年放蜂的地區,寄生率保持在 70% ~ 80%,農藥使用總量減少50% ~80%,大大減少了農作物和土壤中的農藥殘留量,環境質量明顯改善.到目前為止,很多學者對赤眼蜂的生物學特性、種群繁育、應用及農藥對赤眼蜂的藥害與毒性等方面做了大量研究工作,但對赤眼蜂本身對農藥的抵抗能力方面的研究報道較少。為此,作者以松毛蟲赤眼蜂為對象,對其在不同溫度條件下的谷胱甘肽硫轉移酶(GSTs)活性進行了測定,旨在掌握不同溫度條件下赤眼蜂對農藥的抵抗能力,并為赤眼蜂的應用提供基礎數據。
1 、材料及方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供試昆蟲松毛蟲赤眼蜂(采自黑龍江省牡丹江市郊區) ,在 25℃ ± 1℃、75% RH、16L\ue5fe8D 組合條件下,繁育保種 3 代以上。將新羽化的松毛蟲赤眼蜂成蟲在 15℃、25℃、35℃3 個溫度梯度下分別處理 6 h.
1. 1. 2 供試寄住取自本實驗室用麥麩 + 大豆粉飼養的米蛾實驗種群。每日收集當日新產的米蛾卵,經30 w紫外燈、在 40 cm 處照射 40 min 殺死胚胎,置于 4℃下保存,4 d 內使用。
1. 1. 3 藥品0. 2 M 磷酸緩沖液(pH 7. 0) .
A 液 : 0. 2 M Na2HP04溶 液: 稱 量Na2HP04·12H2O 35. 8 g,溶于蒸餾水中,定容至500 ml.
B 液 : 0. 2 M NaH2P04溶 液: 稱 量NaH2PO4·2H20 15. 6 g,溶于蒸餾水中,定容至500 ml,將 A 液和 B 液按 61\ue5fe 39 (V / V) 混合,即成0. 2 M磷酸緩沖液。0. 04 M 磷酸緩沖液(pH7. 0)量取 100 ml0. 2 M 磷酸緩沖液(pH7. 0) ,加入 400 ml 蒸餾水即成。
1. 2 方法
1取適量松毛蟲赤眼蜂成蜂,置于 1 ml0. 04 M磷酸緩沖液中,在冰浴下勻漿,10 800 r·min- 1離心 20 min,取上清作為酶源。
1. 2. 2 谷胱甘肽硫轉移酶活性測定方法采用谷胱甘肽硫轉移酶測定試劑盒(南京建成) 對谷胱甘肽硫轉移酶比活力進行測定,試劑盒有關試劑填加及操作見表 1.
1. 2. 3 谷胱甘肽硫轉移酶比活力計算根據測定數據,按照下列公式計算谷胱甘肽硫轉移酶比活力。
谷胱甘肽硫轉移酶比活力 = (非酶管 OD- 酶管 OD) / (標準管 OD - 空白管 OD) × 標準管濃度(20 μmol·L- 1) × 反應稀釋倍數/反應時間/(取樣量·待測液中蛋白含量) .
2、 結果與分析
不同溫度處理的松毛蟲赤眼蜂谷胱甘肽硫轉移酶比活力測定結果見表 2 ~ 表 5、圖 1.
從表 2 ~ 表 5 中可以看出,不同溫度處理的松毛蟲赤眼蜂,其谷胱甘肽硫轉移酶的比活力差異顯著(P < 0. 05) ,其中: 在 15℃處理條件下,羧酸酯酶的比活力最低,為 6. 80 ±4. 71;35℃ 處理條件下最高,為 98. 22 ± 1. 76; 25℃ 處理介于兩者之間,為 32. 49 ± 2. 60.從圖 1 中可以看出,隨著處理溫度的升高,谷胱甘肽硫轉移酶比活力顯著上升。說明松毛蟲赤眼蜂的抗藥性與溫度密切相關,隨著溫度的升高,抗藥性明顯下降。
3 、小結
以毛蟲赤眼蜂為對象,對其不同溫度條件下的谷胱甘肽硫轉移酶比活力進行測定,結果表明: 在 15℃ 處理條件下,谷胱甘肽硫轉移酶的比活力最低,為 6. 80 ± 4. 71; 35℃ 處理條件下最高,為 98. 22 ±1. 76; 25℃處理介于兩者之間,為 32. 49 ±2. 60,3 種溫度條件下的谷胱甘肽硫轉移酶比活力存在顯著差異(P <0. 05) ,且隨著溫度的升高谷胱甘肽硫轉移酶比活力顯著上升。說明松毛蟲赤眼蜂的抗藥性與溫度密切相關,隨著溫度的升高,抗藥性明顯下降。
為解決溫度升高導致的赤眼蜂抗藥性下降問題,應將蜂卡掛在植株的陰面,或降低掛卡位置,以免陽光直射而提高溫度; 亦可以提高單位面積的蜂卡數量,以彌補赤眼蜂抗藥性降低帶來的寄生量損失。
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